高效液相色譜儀是一種基于液相色譜原理的現代分離分析技術，廣泛應用于化學、食品、生命科學、醫藥及環境等領域。它通過高壓驅動流動相，結合高效固定相，實現對復雜混合物中各組分的快速、高分辨率分離和定量檢測。其核心原理基于混合物中各組分在固定相與流動相間的分配系數差異實現分離。該技術源于經典液相色譜法，通過引入氣相色譜的塔板理論，將流動相輸送壓力提升至百萬帕量級，配合小粒徑填料色譜柱，使理論塔板數達到每米數萬級，分離效率較傳統方法提升1-2個數量級。
一、流動相系統保養
流動相更換與過濾
每日檢查流動相余量，避免泵空轉損壞。
使用前過濾流動相（如0.45μm濾膜），防止顆粒堵塞泵或色譜柱。
避免使用含顆粒或腐蝕性物質的溶劑（如未純化的乙腈、磷酸）。
脫氣處理
流動相需充分脫氣（如超聲波脫氣、在線脫氣機），防止氣泡進入泵或檢測器，導致基線波動或信號異常。
泵維護
定期更換泵密封圈（根據使用頻率，通常每3-6個月），防止漏液。
清洗泵頭：用異丙醇或甲醇沖洗泵頭，去除鹽沉積或有機物殘留。
檢查單向閥：若壓力波動大，可能是單向閥污染，需拆下超聲清洗或更換。
二、進樣系統保養
進樣針清洗
每次進樣后用強溶劑（如甲醇）沖洗進樣針，防止樣品殘留交叉污染。
定期更換進樣針密封墊（如磨損導致漏液或重復性差）。
樣品處理
樣品需過濾（0.22μm或0.45μm濾膜）并脫氣，避免堵塞色譜柱或進樣閥。
避免高粘度或強腐蝕性樣品直接進樣。
三、色譜柱保養
沖洗與保存
每日分析結束后，用初始流動相（如甲醇-水）沖洗色譜柱30分鐘，去除殘留樣品。
長期保存時，用純有機溶劑（如甲醇）沖洗并封存，防止柱床干裂。
壓力監測
記錄色譜柱初始壓力，若壓力突然升高，可能是柱頭污染或塌陷，需反向沖洗或更換。
避免極d條件
避免使用pH>8或<2的流動相（除非色譜柱耐受），防止硅膠基質溶解。
控制流速（通常0.5-1.5mL/min），避免高壓損壞柱床。
四、檢測器保養
紫外檢測器（UV/VIS）
定期更換氘燈（通常2000小時），觀察基線噪聲是否增大。
清洗流通池：用異丙醇或甲醇沖洗，去除鹽沉積或氣泡。
熒光檢測器
避免強光直射，防止光路老化。
定期清洗樣品池，防止熒光淬滅物質積累。
示差折光檢測器（RID）
保持恒溫（如±0.1℃），避免溫度波動影響基線。
避免使用高鹽或高粘度流動相。
五、系統整體維護
泄漏檢查
每日檢查管路連接處、泵頭、進樣閥等部位是否漏液，及時更換密封墊。
軟件與數據備份
定期備份儀器方法、序列和原始數據，防止系統崩潰導致數據丟失。
環境控制
保持實驗室溫度（15-30℃）和濕度（<70%），避免儀器受潮或過熱。
避免震動或陽光直射，防止光學部件移位或老化。
六、定期深度維護
每季度維護
清洗溶劑瓶和溶劑管路，防止微生物滋生。
檢查泵流速準確性（用電子天平稱重法校準）。
潤滑泵活塞（如使用硅脂）。
每年維護
聯系工程師進行全面校準（如波長準確性、流速精度）。
更換脫氣機膜、泵頭過濾器等耗材。
